生物大分子藥物是一類利用現(xiàn)代生物技術(shù)方法生產(chǎn)的源自生物體內(nèi)并被用于疾病的診斷、治療或預(yù)防的生物大分子，狹義上也被稱為生物技術(shù)藥物，如疫苗、抗體藥物，包括單克隆抗體、抗體偶聯(lián)藥物（ADC）、雙特異性抗體、Fc 融合蛋白、抗體片段、多克隆抗體等。與化學合成藥物相比，生物大分子藥物具有相對分子量大，結(jié)構(gòu)復雜、不易透過生物膜、給藥劑量低和易在體內(nèi)降解等特點。隨著生物技術(shù)的迅猛發(fā)展，生物大分子藥物已被廣泛用于治療腫瘤、自身免疫性疾病和代謝性疾病等多種疾病。然而因此類藥物生產(chǎn)技術(shù)和本身分子量較大等特點，大分子藥物往往會出現(xiàn)免疫原（Immunogenicity）。

免疫原性（Immunogenicity）是當治療類蛋白產(chǎn)品作為某些疾病的治療藥物時，被機體識別為外來物質(zhì)（抗原）而產(chǎn)生的免疫應(yīng)答。然而對于治療性蛋白的這一免疫應(yīng)答往往是不必要或非預(yù)期的，且在此應(yīng)答過程中可導致機體產(chǎn)生抗藥抗體（Anti-drug antibodies，ADAs），包括抗藥抗體、中和抗體、免疫復合物等，ADA的存在可影響藥物的生物學活性、藥代動力學參數(shù)，甚至使得藥物原有的療效降低或缺失，而當有些免疫應(yīng)答與機體內(nèi)源性蛋白產(chǎn)生交叉免疫反應(yīng)，則可能帶來嚴重的臨床安全問題。

圖一 免疫原性的影響

正是基于此， 免疫原性的評估亟需相關(guān)技術(shù)規(guī)范文件予以支持。

2007年歐洲藥品監(jiān)管機構(gòu)（EMA）的人用藥品委員會 (CHMP) 發(fā)布免疫原性評估的指導原則但并未對如何產(chǎn)生相應(yīng)數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)作出詳細規(guī)定，在2017年EMA發(fā)布了該指導原則的最終版本（Final Version），但仍沒有出現(xiàn)技術(shù)細節(jié)上的詳細規(guī)定，EMA貫徹其適用目的原則（fit to purpose, FTP），要求申辦方選擇最優(yōu)的方法來響應(yīng)或滿足監(jiān)管要求，具有相對靈活性。

美國FDA則于2014年首次發(fā)布了免疫原性評估指導原則，其中給出免疫原性的影響因素和評價策略。并于2019年發(fā)布的免疫原性評估指導原則《Immunogenicity Testing of Therapeutic Protein Products —Developing and Validating Assays for Anti-Drug Antibody Detection Guidance for Industry 》中將“免疫原性”定義為治療性蛋白產(chǎn)品對自身和相關(guān)蛋白產(chǎn)生免疫應(yīng)答或誘發(fā)免疫相關(guān)臨床不良事件的傾向。

國家藥品監(jiān)督管理局（NMPA）于2020年08月24日發(fā)布了《藥物免疫原性研究技術(shù)指導原則（征求意見稿）》，并于2021年03月29日發(fā)布正式版本，其總體的評估策略與FDA相同，與已有的FDA和EMA指導原則有所不同，NMPA正式版則充分考慮到了非臨床和臨床研究中免疫原性檢測方法的差別。這一指導原則的出臺，為國內(nèi)免疫原性相關(guān)研究提供了至關(guān)重要的規(guī)范性指導。

對于ADA的檢測，NMPA、FDA、EMA的檢測決策基本一致，三者均提倡多層級的評估策略：

（1）篩選試驗：對所有樣本進行，篩選出疑似陽性樣品；

（2）確證試驗：對疑似陽性樣本進行特異性的確證試驗，確定陽性樣本；

（3）滴度試驗：對已確定抗體陽性的樣本進行滴度試驗，確定陽性相對強弱；功能性試驗對抗體進行中和活性檢測。

圖二 ADA檢測的分級評估策略

圖三 NMPA、FDA、EMA指導原則中驗證的內(nèi)容和接受標準異同點

對于抗藥抗體檢測針對不同的檢測需求和難度可以采用不同的方法和儀器，包含但不局限于：直接法、橋聯(lián)法和均相結(jié)合法等。傳統(tǒng)的檢測儀器有酶標儀、MSD等，目前基于MSD（電化學發(fā)光） 平臺的橋接法是ADA檢測中最經(jīng)典的方法。而在安徽萬邦醫(yī)藥分析測試中心平臺正擁有此類完善的檢測設(shè)備和多年的生物分析經(jīng)驗，檢測能力涵蓋藥代動力學(PK)，藥效學(PD)，抗藥抗體(ADA)，中和抗體(NAb)，和生物標志物(Biomarker)檢測等，可根據(jù)客戶需求提供完善的方法學開發(fā)、驗證和生物樣本檢測服務(wù)，歡迎全國各地的朋友前來合作咨詢。

參考資料

［1］《藥物免疫原性研究技術(shù)指導原則(征求意見稿)》NMPA, 2020.08

［2］《藥物免疫原性研究技術(shù)指導原則》,NMPA, 2021.03. 

［3］Immunogenicity Testing of Therapeutic Protein Products — Developing and Validating Assays for Anti-Drug Antibody Detection Guidance for Industry, January 2019.

［4］Guide line on Immunogenicity assessment of biotechnology-derived therapeutic proteins (EMEA/CHMP/BMWP/14327/2006 Rev 1), 1st Dec 2017.